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Universidade Federal da Bahia |
Repositório Institucional da UFBA
Please use this identifier to cite or link to this item: https://repositorio.ufba.br/handle/ri/40264
metadata.dc.type: Dissertação
Title: Avaliação do papel dos diferentes isolados de Leishmania Braziliensis e dos monócitos na patogênese da Leishmaniose Disseminada
metadata.dc.creator: Dórea, Andreza Santos
metadata.dc.contributor.advisor1: Oliveira, Camila Indiani de
metadata.dc.contributor.referee1: Oliveira, Camila Indiani de
metadata.dc.contributor.referee2: Carvalho, Natália Barbosa
metadata.dc.contributor.referee3: Bacellar, Maria Olivia Amado Ramos
metadata.dc.description.resumo: Introdução: A Leishmaniose Disseminada (LD) causada por Leishmania braziliensis, é caracterizada pela presença de 10 ou mais lesões papulares, acneiformes e ulceradas. Alguns estudos têm mostrado que L.braziliensis isoladas de pacientes com LD, leishmaniose cutânea (LC) e leishmaniose mucosa (LM) são polimórficas, apresentando uma diversidade genética que está associada com as formas clínicas na leishmaniose tegumentar americana (LTA). O antígeno solúvel obtido de isolados de L.braziliensis de pacientes LD induz uma resposta inflamatória maior quando comparado com antígeno obtido de isolados de pacientes com LC em células de pacientes com LC e LD. Estudos têm mostrado que monócitos/macrófagos de pacientes com LC e LM comportam-se de maneira diferente frente à infecção com L.braziliensis quando comparado com células de controles sadios (CS). Ainda não existem estudos sobre o comportamento dos monócitos na LD. Objetivo: Avaliar o papel de monócitos e de isolados de Leishmania braziliensis genotipicamente diferentes na resposta inflamatória observada na leishmaniose disseminada. Métodos: Monócitos de pacientes com LD (n=12), LC (n=12) e de CS (n=5) foram infectados com isolados de L. braziliensis de pacientes com LD e isolados de pacientes com LC na proporção de 5:1. A avaliação do grau de infecção e da carga parasitária foi avaliada através da contagem de preparações de cytospin por microscopia óptica. Para a análise da sobrevivência dos diferentes isolados de L. braziliensis em monócitos de pacientes com LC,LD e CS foi realizada a contagem de promastigotas viáveis no sobrenadante de culturas utilizando a técnica de microscopia óptica. A avaliação da produção dos radicais oxidativos foi realizada pela oxidação da Dihidrorodamina 123 (DHR-123) e analisada através da citometria de fluxo. A expressão de TLRs e de citocinas/quimiocinas foi avaliada através de citometria de fluxo. Resultados: A frequência de monócitos de pacientes com LD infectados com isolado de LD e a carga parasitária foi maior do que a observada em monócitos infectados com o isolado LC após 48 horas de infecção. O mesmo foi observado nas células de pacientes com LC. O número de promastigotas viáveis no sobrenadante de monócitos infectado com o isolado LD foi maior quando comparado com o isolado LC em ambos os grupos. O mesmo foi observado em monócitos de CS. A produção de burst oxidativo pelos monócitos de LD, LC e CS infectados com isolado LD foi maior quando comparada a isolado de LC. A expressão de TLR2 foi maior em monócitos LD após infecção com isolado LD quando comparado com isolado LC. A produção de CXCL9 em monócitos de LD foi maior após a infecção com o isolado de LD quando comparado com o isolado LC. Conclusão: Esses resultados sugerem que as diferenças genotípicas da L.braziliensis que causa LD e LC podem influenciar o comportamento desse parasito nos monócitos humanos e contribuir para a patogênese da doença.
Abstract: Introduction: Disseminated Leishmaniasis (LD) caused by Leishmania braziliensis, is characterized by the presence of 10 or more papular, acneiform and ulcerated lesions. Some studies have shown that L.braziliensis isolated from patients with LD, cutaneous leishmaniasis (CL) and mucosal leishmaniasis (LM) are polymorphic, presenting a genetic diversity that is associated with the clinical forms in American cutaneous leishmaniasis (ATL). Soluble antigen obtained from L.braziliensis isolates from LD patients induces a greater inflammatory response when compared to antigen obtained from isolates from CL patients on cells from CL and LD patients. Studies have shown that monocytes/macrophages from patients with CL and LM behave differently when faced with infection with L.braziliensis when compared to cells from healthy controls (CS). There are still no studies on the behavior of monocytes in LD. Objective: To evaluate the role of monocytes and genotypically different Leishmania braziliensis isolates in the inflammatory response observed in disseminated leishmaniasis. Methods: Monocytes from patients with LD (n=12), LC (n=12) and CS (n=5) were infected with L. braziliensis isolates from patients with LD and isolates from patients with LC in a ratio of 5: 1. Assessment of the degree of infection and parasite load was assessed by counting cytospin preparations by optical microscopy. To analyze the survival of different L. braziliensis isolates in monocytes from patients with LC, LD and CS, viable promastigotes were counted in the culture supernatant using the optical microscopy technique. The evaluation of the production of oxidative radicals was carried out by the oxidation of Dihydrorhodamine 123 (DHR-123) and analyzed using flow cytometry. The expression of TLRs and cytokines/chemokines was evaluated using flow cytometry. Results: The frequency of monocytes from LD patients infected with the LD isolate and the parasite load was higher than that observed in monocytes infected with the LC isolate after 48 hours of infection. The same was observed in cells from patients with CL. The number of viable promastigotes in the supernatant of monocytes infected with the LD isolate was higher when compared with the LC isolate in both groups. The same was observed in CS monocytes. The production of oxidative burst by LD, LC and CS monocytes infected with LD isolate was greater when compared to LC isolate.Conclusion: These results suggest that the genotypic differences of L.braziliensis that causes LD and LC may influence the behavior of this parasite in human monocytes and contribute to the pathogenesis of the disease.
Keywords: Isolados de L. braziliensis
Leishmaniose Disseminada
metadata.dc.subject.cnpq: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE
metadata.dc.language: por
metadata.dc.publisher.country: Brasil
Publisher: Universidade Federal da Bahia
metadata.dc.publisher.initials: UFBA
metadata.dc.publisher.department: Faculdade de Medicina da Bahia
metadata.dc.publisher.program: Pós-Graduação em Ciências da Saúde (POS_CIENCIAS_SAUDE) 
Citation: DÓREA, Andreza Santos. Avaliação do papel dos diferentes isolados de Leishmania Braziliensis e dos monócitos na patogênese da Leishmaniose Disseminada/ Dissertação de mestrado. Instituto de Ciências da Saúde - Salvador, 2019.
metadata.dc.rights: Acesso Aberto
URI: https://repositorio.ufba.br/handle/ri/40264
Issue Date: 20-Feb-2019
Appears in Collections:Dissertação (PPgCS)

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