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Tipo: Dissertação
Título: Caracterização dos aspectos imunológicos na Leishmaniose Recidiva Cútis
Autor(es): Farias, Lailla Thayse Macedo
Primeiro Orientador: Andrade, Jorge Clarêncio
metadata.dc.contributor.referee1: Costa, Jaqueline França
metadata.dc.contributor.referee2: Cardoso, Thiago Marconi de Souza
metadata.dc.contributor.referee3: Andrade, Jorge Clarêncio de Souza
Resumo: INTRODUÇÃO: Considerada uma forma rara da Leishmaniose Tegumentar, a Leishmaniose Recidiva Cútis (LRC) é caracterizada por lesões nodulares em torno ou no interior da cicatriz de uma úlcera previamente produzida por Leishmania spp., de aparecimento tardio e longa duração. OBJETIVO: Caracterizar citocinas, quimiocinas e células T de memória imunológica em pacientes com LRC e LCL. MATERIAIS E MÉTODOS: O grupo amostral é representado por 36 pacientes com LRC e 36 com LCL, diagnosticados como positivos pelo teste parasitológico e pelo teste de Montenegro. Foram dosadas as citocinas dos kits “inflamatório” (IL-1β, IL-8, IL-10, e IL-12p40) , “Th1/Th2/IL 17” (IL2, IL-4, IL-6, TNF, IFN e IL17) e “quimiocinas” (Rantes, MIG, MCP-1 e IP-10) utilizando kits Cytometric Bead Array (CBA) no plasma e in vitro. Para a marcação extracelular de células de memória foram utilizados anticorpos monoclonais específicos, conjugados com fluorescências para moléculas de caracterização celular (CD4+ ou CD8+). Para o painel foi inserida a marcação para células de memória CD45RO+ e CCR7+ (naive, memória efetora (TME), memória central (TMC) e células efetoras); moléculas de ativação celular (CD25, CD69 e HLA-DR) e moléculas de adesão (CD62Llow e CD62high). As amostras foram adquiridas no FACSFortessa (BD) e analisadas no Graph Pad. RESULTADOS: As citocinas plasmáticas dosadas nos kits “inflamatório” e “Th1/Th2/IL-17” em LRC e LCL estavam mais elevadas entre os indivíduos de lesão ativa ou curados em relação aos controles sadios. Em LRC IL-8 e IL-12p40 apresentaram significância somente dos curados em relação aos controles sadios. In vitro, no kit “Th1/Th2/IL-17” não foram evidenciadas diferenças ao analisar as formas clínicas isoladamente (ativos versus curados) e nem entre si (LRC versus LCL). Os níveis de IL-8 em LRC e LCL estiveram mais elevados entre os ativos e curados após estímulo com Leishmania braziliensis. Ao comparar LRC versus LCL MIG (CXCL9) e IP-10 (CXCL10), responsáveis pelo recrutamento celular para o local da infecção, apresentaram-se diminuídas no plasma de indivíduos com lesão ativa. Não foi detectada diferença entre as formas clínicas na expressão de CD45RO+ em linfócitos T (CD4+ e CD8+) de memória imunológica. Já os marcadores de ativação CD25 (ativação intermediária) e HLA-DR (ativação tardia) apresentaram menor expressão em pacientes com LRC em relação aos ativos por LCL, e as células T, tanto CD4+ quanto CD8+, de pacientes com LRC em relação aos pacientes LCL apresentaram menor expressão CD62Llow, maior quantidade de CD62Lrigh e menor quantidade de células TME no sangue periférico. CONCLUSÕES: Nossos dados sugerem que na LRC, a diminuição de IP-10 poderia caracterizar-se como biomarcador para identificação precoce desta forma clínica e que possa estar relacionada aos demais eventos da resposta celular (ativação, migração e memória efetora), associada a difícil resposta terapêutica e resistência ao tratamento.
Abstract: INTRODUCTION: Considered a rare condition of Cutaneous Leishmaniasis, Cutaneous Recurrent Leishmaniasis (LCR) is characterized by nodular lesions around or within the scar of an ulcer previously produced by Leishmania spp., with late onset and long lasting. OBJECTIVE: To characterize cytokines, chemokines and immune memory T cells in patients with LRC and LCL. MATERIALS AND METHODS: The sample group is represented by 36 patients with LRC and 36 with LCL, diagnosed as positive by the parasitological test and the Montenegro test. Cytokines from the “inflammatory” (IL-1β, IL-8, IL-10, and IL-12p40), “Th1/ Th2/ IL 17” (IL2, IL-4, IL-6, TNF, IFN and IL17) and "chemokines" (Rantes, MIG, MCP-1 and IP-10) using plasma and in vitro Cytometric Bead Array (CBA) kits. For extracellular labeling of memory cells specific fluorescence-conjugated monoclonal antibodies were used for cell characterization molecules (CD4+ or CD8+). For the panel was inserted the marking for memory cells CD45RO+ and CCR7+ (naive, effector memory (TME), central memory (TMC) and effector cells); cell activation molecules (CD25, CD69 and HLA-DR) and adhesion molecules (CD62Llow and CD62high). Samples were purchased from FACS Fortessa (BD) and analyzed on GraphPad. RESULTS: The plasma cytokines dosed in the “inflammatory” and “Th1/ Th2/IL-17” kits in LRC and LCL were higher among active or healed individuals than healthy controls. In LRC IL-8 and IL-12p40 presented significance only of the cured in relation to healthy controls. In vitro, in the “Th1/Th2/ IL-17” kit, no differences were evidenced when analyzing the clinical forms alone (active versus cured) and neither (LRC versus LCL). IL-8 levels in LRC and LCL were higher among active and cured after stimulation with Leishmania braziliensis. Comparing LRC versus LCL MIG (CXCL9) and IP-10 (CXCL10), responsible for cellular recruitment to the site of infection, were decreased in the plasma of individuals with active lesion. No difference was detected between clinical forms in CD45RO+ expression in immune memory T lymphocytes (CD4+ and CD8+). The markers of CD25 activation (intermediate activation) and HLA-DR (late activation) showed lower expression in patients with LRC compared to those active by LCL, and CD4+ and CD8+ T cells of patients with LRC compared to patients. LCL showed lower CD62Llow expression, higher amount of CD62Lrigh and lower number of TME cells in peripheral blood. CONCLUSÕES: Our data suggest that in LRC, the decrease in IP-10 could be characterized as a biomarker for early identification of this clinical form and may be related to other cellular response events (activation, migration and effector memory), associated with difficult therapeutic response. and resistance to treatment.
Palavras-chave: Leishmaniose
Citocinas
Imunidade Celular
CNPq: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA
Idioma: por
País: Brasil
Editora / Evento / Instituição: Universidade Federal da Bahia
Sigla da Instituição: UFBA
metadata.dc.publisher.department: Faculdade de Medicina da Bahia
metadata.dc.publisher.program: Pós-Graduação em Patologia Humana e Patologia Experimental (PGPAT) 
Tipo de Acesso: CC0 1.0 Universal
metadata.dc.rights.uri: http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/
URI: https://repositorio.ufba.br/handle/ri/38657
Data do documento: 13-Jan-2020
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