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Universidade Federal da Bahia |
Repositório Institucional da UFBA
Use este identificador para citar ou linkar para este item: https://repositorio.ufba.br/handle/ri/36779
Tipo: Tese
Título: Estudo do efeito da modulação de caveolina-1 em carcinoma epidermóide de boca
Autor(es): Nascimento, Rebeca Barros
Primeiro Orientador: Xavier, Flávia Caló Aquino
metadata.dc.contributor.advisor-co1: Paiva, Katiúcia Batista da Silva
metadata.dc.contributor.referee1: Xavier, Flávia Caló Aquino
metadata.dc.contributor.referee2: Leitão, Águida Cristina Gomes Henriques
metadata.dc.contributor.referee3: Coletta, Ricardo Della
metadata.dc.contributor.referee4: Nunes, Fábio Daumas
metadata.dc.contributor.referee5: Pegoraro, Camila de Oliveira Rodini
Resumo: Introdução: O Carcinoma epidermóide bucal (CEB) apresenta capacidade invasiva e metastática como consequência de alterações fenotípicas e genotípicas, como o processo de transição epitelial-mesenquimal (TEM). Alterações nas membranas das células podem afetar a estrutura de cavéolas, compostas por colesterol e caveolinas (CAV), estando associadas ao processo de tumorigênese. A depleção de colesterol e alteração da expressão de CAV1 podem afetar células tumorais e interferir na carcinogênese. Objetivo: Avaliar a expressão de CAV1 em tumores de CEB e o efeito da depleção de colesterol e do silenciamento de CAV1 (siCAV1) em linhagens celulares de CEB de língua. Material e métodos: Hibridização por microarray, expressão de mRNA e imunohistoquímica foram realizadas em amostras de CEB e de tecido não tumoral (margem). Os tumores foram divididos nos grupos: mais (T1 / T2 N +, n = 14) e menos (T3 / T4 N0, n = 19) agressivos. O efeito da depleção de colesterol e do silenciamento de CAV1 foram analisados em linhagens celulares SCC-25, com perfil não metastático, e HSC-3, com perfil metastático, e foram avaliados viabilidade celular, fluidez da membrana, expressão gênica e protéica de CAV1 e dos marcadores de TEM (E-caderina, N-caderina, β-catenina e Vimentina) e suas capacidades migratória e invasiva. Resultados: CAV1 foi 1,77 vezes mais expressa em tumores do que em tecidos não tumorais e cerca de 2 x mais expresso em tumores mais agressivos do que em menos agressivos. qRT-PCR não mostrou diferença na expressão de CAV1 em nenhuma comparação feita. A proteína CAV1 foi localizada tanto no epitélio tumoral quanto no estroma, em três padrões diferentes. Positividade no estroma foi associado a tumores de maior tamanho. Além disso, as células epiteliais tumorais positivas para CAV1 tenderam a estar associadas a CAV1 baixo ou negativo no estroma tumoral. A depleção de colesterol reudziu a viabilidade celular e fluidez de membrana nas células SCC-25, enquanto que a viabilidade das células HSC-3 foi menos afetada pela depleção e sem alterações na fluidez da membrana. A depleção de colesterol interferiu na expressão de CAV1 e de marcadores de TEM em ambas as células, e diminuiu sua capacidade migratória, sendo a SCC-25 mais afetada. A capacidade invasiva das células metastáticas também reduziu, mas a das células não metastáticas aumentou com a depleção de colesterol. O siCAV-1 aumentou a viabilidade celular apenas em SCC-25 e a expressão gênica de marcadores de TEM (N-caderina e β-catenina), mas não os níveis de proteína, apenas em HSC-3. Além disso, o siCAV1 estimulou a capacidade de invasão de células metastáticas. Conclusão: A mudança da expressão de CAV1 de células epiteliais tumorais para células estromais tumorais pode ser útil para prever a agressividade do CEB. Tanto a depleção de colesterol quando o siCAV1 alteram a viabilidade de células tumorais e afetam a expressão de marcadores de TEM, o que interfere nas capacidades migratória e invasiva. A resposta celular à depleção de colesterol foi diferente da resposta ao silenciamento de CAV1, o que também variou entre as células não metastáticas e metastáticas.
Abstract: Introduction: Oral squamous cell carcinoma (OSCC) presents invasive and metastatic capacity as a consequence of phenotypic and genotypic alterations, such as the epithelial-mesenchymal transition (EMT). Changes in cell membranes can affect the structure of caveolae, composed of cholesterol and caveolins (CAV), which are associated with the tumorigenesis process. Cholesterol depletion and altered CAV1 expression can affect tumor cells and interfere with carcinogenesis. Objective: To evaluate the expression of CAV1 in OSCC tumors and the effect of cholesterol depletion and CAV1 silencing (siCAV1) in tongue OSCC cell lines. Material and methods: Microarray hybridization, mRNA expression and immunohistochemistry were performed on OSCC and non-tumor tissue (margin) samples. Tumors were divided into groups: more (T1 / T2 N +, n = 14) and less (T3 / T4 N0, n = 19) aggressive. The effect of cholesterol depletion and siCAV1 were analyzed in SCC-25 cell lines, with a non-metastatic profile, and HSC-3, with a metastatic profile, and cell viability, membrane fluidity, gene and protein expression of CAV1 and of EMT markers (E-cadherin, N-cadherin, β-catenin and Vimentin) were evaluated and their migratory and invasive capacities. Results: CAV1 was 1.77 times more expressed in tumors than in non-tumor tissues and about 2 times more expressed in more aggressive than in less aggressive tumors. qRT-PCR showed no difference in CAV1 expression in any comparison made. The CAV1 protein was located both in the tumor epithelium and in the stroma, in three different patterns. Stromal positivity has been associated with larger tumors. Furthermore, CAV1-positive tumor epithelial cells tended to be associated with low or negative CAV1 in the tumor stroma. Cholesterol depletion reduced cell viability and membrane fluidity in SCC-25 cells, whereas the viability of HSC-3 cells was less affected by depletion and no changes in membrane fluidity was observed. Cholesterol depletion interfered with the expression of CAV1 and of EMT markers in both cells, and decreased their migratory capacity, with SCC-25 being more affected. The invasive capacity of metastatic cells was also reduced, but of non-metastatic cells increased with cholesterol depletion. siCAV-1 increased cell viability only in SCC-25 and gene expression of EMT markers (N-cadherin and β-catenin), but not protein levels, only in HSC-3. Furthermore, siCAV1 stimulated the invasiveness of metastatic cells. Conclusion: The switch of CAV1 expression from tumor epithelial cells to tumor stromal cells may be useful to predict OSCC aggressiveness. Both cholesterol depletion and siCAV1 change the viability of tumor cells and affect the expression of EMT markers, which interferes with migratory and invasive capabilities. Cellular response to cholesterol depletion was different from response to CAV1 silencing, which also varied between non-metastatic and metastatic cells.
Palavras-chave: Carcinoma epidermóide de boca
Transição epitelial-mesenquimal
Caveolina1
Depleção de colesterol
CNPq: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::ODONTOLOGIA
Idioma: por
País: Brasil
Editora / Evento / Instituição: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA
Sigla da Instituição: UFBA
metadata.dc.publisher.department: Faculdade de Odontologia
metadata.dc.publisher.program: Programa de Pós-Graduação em Odontologia e Saúde 
Tipo de Acesso: CC0 1.0 Universal
metadata.dc.rights.uri: http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/
URI: https://repositorio.ufba.br/handle/ri/36779
Data do documento: 26-Ago-2021
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