https://repositorio.ufba.br/handle/ri/37987
Tipo: | Tese |
Título: | Aspectos regenerativos e imunomodulatórios das células estromais mesenquimais do tecido adiposo em modelo murino de anemia falciforme |
Título(s) alternativo(s): | Regenerative and immunomodulatory aspects of mesenchymal strmal cells from adipose tissue in a murine model of sickle cell anemia |
Autor(es): | Silveira, Brysa Mariana Dias |
Primeiro Orientador: | Fortuna, Vitor Antonio |
metadata.dc.contributor.advisor-co1: | Freire, Songeli Menezes |
metadata.dc.contributor.referee1: | Tavares, Natalia Machado |
metadata.dc.contributor.referee2: | Adorno, Elisângela Vitória |
metadata.dc.contributor.referee3: | Souza, Bruno Solano de Freitas |
metadata.dc.contributor.referee4: | Ribeiro Filho, Jaime |
metadata.dc.contributor.referee5: | Fortuna, Vitor Antonio |
Resumo: | Úlceras crônicas de perna (CLU) são complicações microvasculares comuns em pacientes com anemia falciforme. CLUs são recalcitrantes e na ausência de tratamento podem levar à amputação dos membros inferiores. As células estromais do tecido adiposo (ASC) representam uma alternativa para o tratamento de CLUs, devido a sua capacidade de secretar mediadores solúveis envolvidos no reparo tecidual. Desta forma, avaliamos os efeitos do secretoma de ASC em modelo in vitro de células endoteliais do cordão umbilical (HUVECs) e em modelo in vivo com camundongos C57BL/6 transgênicos e camundongos Towness falciformes. Nosso trabalho observou que o secretoma de ASC pré-condicionado em normóxia (condição com 20% de oxigênio) e hipóxia (condição com 5% de oxigênio) apresentou em sua composição marcadores de regeneração tecidual (ex: VEGF, MCP1, IL-8 e Angiogenina). A análise in vitro demonstrou que ambos os meios condicionados (MCs) exerceram ação anti-apoptótica e angiogênica em HUVECs, com melhor desempenho das células tratadas com MC em normóxia. Nosso modelo in vivo utilizando camundongos transgênicos Nestin-GFP+/NG2-DsRed+ revelou aceleração do processo cicatricial de feridas tratadas com os MCs. Considerando que o nosso produto terapêutico apresentou melhor desempenho em condições de normóxia, analisamos o potencial terapêutico do MC normóxia em modelo de cicatrização com camundongos falciformes. Neste trabalho, buscamos avaliar o efeito pró-angiogênico e imunomodulatório em peles tratadas com o MC através das técnicas de imunohistoquímica, imunofluorescência e RT-PCR. Nossos resultados revelaram que a administração do MC foi capaz de estimular o processo de cicatrização através da redução da inflamação local, aumento do número de fibroblastos e maior produção de colágeno, bem como através da redução de transcritos inflamatórios, evidenciando o efeito terapêutico do MC sobre a imunomodulação. |
Abstract: | Chronic leg ulcers (CLU) are common microvascular complications in patients with sickle cell anemia. CLUs are recalcitrant and the absence of treatment can lead to lower limb amputation. Adipose tissue stromal cells (ASC) represent an alternative for the treatment of CLUs, due to their ability to secrete soluble mediators involved in tissue repair. Thus, we evaluated the effects of the ASC secretome in vitro model of umbilical cord endothelial cells (HUVECs) and in vivo model with transgenic Nestin- GFP+/NG2-DsRed+ mice and sickle Towness mice. Our work found that the secret of ASC preconditioned in normoxia (condition with 20% oxygen) and hypoxia (condition with 5% oxygen) presented in its composition markers of tissue regeneration (eg: VEGF, MCP1, IL-8 and angiogenin). In vitro analysis demonstrated that both conditioned media (CMs) exerted anti-apoptotic and angiogenic action on HUVECs, with better performance of cells treated with CM in normoxia. Our in vivo model using C57BL/6 transgenic mice revealed radiation from the healing process of wounds treated with MCs. Considering that our therapeutic product performed better under conditions of normoxia, we analyzed the therapeutic potential of MC normoxia in wound healing model with sickle cell mice. In this work, we sought to evaluate the proangiogenic and immunomodulatory effect in skins treated with CM using immunohistochemistry, immunofluorescence and RT-PCR techniques. Our results revealed that CM administration was able to stimulate the healing process by reducing local inflammation, increasing the number of fibroblasts and increasing collagen production. Just as we identified reduced expression of inflammatory transcripts, evidencing the therapeutic effect of MC on immunomodulation. |
Palavras-chave: | Anemia falciforme Úlceras crônicas de pernas Angiogênese Imunomodulação Células estromais mesenquimais |
CNPq: | CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA |
Idioma: | por |
País: | Brasil |
Editora / Evento / Instituição: | Universidade Federal da Bahia |
Sigla da Instituição: | UFBA |
metadata.dc.publisher.department: | Instituto de Ciências da Saúde - ICS |
metadata.dc.publisher.program: | Programa de Pós-Graduação em Imunologia - (PPGIM) |
Citação: | SILVEIRA, Brysa Mariana Dias. Aspectos regenerativos e imunomodulatórios das células estromais mesenquimais do tecido adiposo em modelo murino de anemia falciforme. 2023. 106 f. Tese (Doutorado) - Universidade Federal da Bahia, Instituto de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Imunologia, Salvador, 2023. |
Tipo de Acesso: | CC0 1.0 Universal |
metadata.dc.rights.uri: | http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/ |
URI: | https://repositorio.ufba.br/handle/ri/37987 |
Data do documento: | 8-Ago-2023 |
Aparece nas coleções: | Tese (PPGIM) |
Arquivo | Descrição | Tamanho | Formato | |
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