Determinação quantitativa de células e citocinas da resposta imune em pacientes progressores lentos infectados pelo HIV

Abstract

RACIONAL: Os pacientes não-progressores de longo prazo (LTNP) do HIV, constituem um subgrupo de infectados que permanecem com nível sérico viral indetectável, ou seja, abaixo de 5000 cópias de RNA/mL, por um período superior a 10 anos de infecção, sem terapia anti-retroviral (ART). A técnica de imunofenotipagem para análise celular, e a citometria de fluxo são importantes ferramentas para acompanhamento da patogênese viral, assim como, identificação de células que podem demonstrar uma resposta imune peculiar, frente a um microorganismo que desafia a ciência. OBJETIVOS: Determinar e comparar o padrão de células da resposta imune inata em pacientes HIV-1 positivos com e sem progressão lenta. Associando, a influência quantitativa das células da resposta imune inata na produção de citocinas em pacientes HIV-1 positivos e comparando o perfil destas citocinas nos pacientes infectados com e sem progressão lenta. MÉTODOS: Para análise celular, foram avaliados 42 indivíduos soropositivos para o HIV-1, atendido no Hospital Universitário Professor Edgard Santos, onde, 20 destes pacientes eram LTNP, 22 HIV crônicos e também 20 indivíduos voluntários hígidos. Amostras de sangue periférico foram submetidas à marcação através de anticorpos monoclonais anti-CD3+, anti-CD4+, anti-CD8+, anti-CD45+, anti-CD45RA+, anti-CD45+RO, anti-CD5+/CD19+,anti-CD16+/CD56+ anti-CD4+/CD25+ e anti-CD11c/CD40 para a avaliação da imunofenotipagem celular e técnica de CBA para as citocinas IL-2,IL-6, IL-10, TNF,IL-1a e IFN-g. RESULTADOS: Pacientes LTNP apresentaram uma equivalência em relação às médias das linfócitos TCD4+ LTCD8+, DCs, NK e monócitos em comparação ao grupo de indivíduos hígidos. Houve significância estatística nas variações dos LT-näive, LT- memória, LB e Treg nos pacientes LTNP, quando comparados ao grupo de indivíduos hígidos como também, as variações no LT-näive, LT- memória, LB e Treg, monócitos, utilizando um p<0,05, em relação às médias das células do grupo de pacientes HIV/AIDS e as células do grupo de indivíduos controle. Foram avaliados em todos os grupos, os parâmetros de faixa etária e contagem de células, no entanto, não houve interferência estatística para esta avaliação. Com relação às citocinas, o valor médio de IL-2 com diferença significante em comparação aos grupos HIV/AIDS e controle. Nas citocinas IL-2 e IL-6, houve diferença estatística em comparação a progressores lentos e indivíduos hígidos. Todavia, entre IL-10, TNF, IL-1a e IFN-g não houve significância estatística entre os grupos estudados. CONCLUSÃO: Indivíduos LTNP, apresentaram uma frequência de LTCD4+ em níveis da normalidade, como também a expressão das DCs, Treg e NK. Alterações na produção de LTCD8+ foram observadas em análises citometricas em pacientes HIV/AIDS e o valor de LTCD4+ interfere na produção de IL-2 em progressores lentos e IL-6 em HIV/AIDS.

BACKGROUND: The long-term non-progressor (LTNP) patients with HIV, also known as elite controllers, are a subgroup of infected individuals who remain with an undetectable viral serum level, ie below 5000 copies RNA / ml, for a period greater than 10 years of infection, without antiretroviral therapy (ART).The immunophenotyping technique for cell analysis and flow cytometry are important tools for monitoring viral pathogenesis, as well as identifying cells that may demonstrate a peculiar immune response to a microorganism that challenges science. OBJECTIVES: To determine and compare the cell pattern of the innate immune response in HIV-1 positive patients with and without long-term non-progressor. Associating the quantitative influence of innate immune cells on cytokine production in HIV-1 positive patients and comparing the profile of these cytokines in patients with and without long-term non-progressor. METHODS: A total of 42 HIV-1 seropositive individuals were evaluated at the University Hospital Professor Edgard Santos, where 20 of these patients were LTNP, 22 were HIV-positive and 20 were healthy volunteers. Samples were subjected to labeling by anti-CD3 +, anti-CD4 +, anti-CD8 +, anti-CD45 +, anti-CD45RA +, anti-CD45 + RO, anti-CD5 + / CD19 +, anti-CD16 + CD25 + and anti-CD11c / CD40 for the evaluation of cellular immunophenotyping and CBA technique for cytokines IL-2, IL-6, IL-10, TNF, IL-1a and IFN-g. RESULTS: LTNP patients had an equivalence in relation to T lymphocytes CD4 + and LTCD8 +, DCs, NK and monocytes compared to the healthy individuals group. There were statistically significant differences in LT-naive, LT-memory, LB and Treg in LTNP patients, when compared to the healthy individuals group, as well as variations in LT-naive, LT-memory, LB and Treg, monocytes using a p <0.05 in relation to the means of the cells of the group of patients HIV / AIDS and the cells of the group of control individuals. All groups, age group parameters and cell counts were evaluated; however, there was no statistical interference for this evaluation. Regarding the cytokines, the mean value of IL-2 with significant difference in comparison to the HIV/AIDS and control groups. In IL-2 and IL-6 cytokines, there was a statistical difference compared to LTNP patients and healthy individuals. However, between IL-10, TNF, IL-1a and IFN-g there was no statistical significance between the groups studied. CONCLUSION: LTNP patients showed a production of LTCD4 + at normal levels, as well as the expression of DCs, Treg and NK. Changes in LTCD8 + production have been observed in cytometic analyzes in HIV/AIDS patients and the value of LTCD4 + interferes in the production of IL-2 in LTNP patients and IL-6 in HIV / AIDS.