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https://repositorio.ufba.br/handle/ri/18012
Registro completo de metadados
Campo DC | Valor | Idioma |
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dc.contributor.author | Freire, Songelí Menezes | - |
dc.contributor.author | Nascimento, Ivara | - |
dc.contributor.author | Simões, Juçara | - |
dc.contributor.author | Costa, Maria de Fátima Dias | - |
dc.contributor.author | Schaer, Robert Eduard | - |
dc.contributor.author | Nascimento, Roberto José Meyer | - |
dc.creator | Freire, Songelí Menezes | - |
dc.creator | Nascimento, Ivara | - |
dc.creator | Simões, Juçara | - |
dc.creator | Costa, Maria de Fátima Dias | - |
dc.creator | Schaer, Robert Eduard | - |
dc.creator | Nascimento, Roberto José Meyer | - |
dc.date.accessioned | 2015-08-03T18:58:10Z | - |
dc.date.available | 2015-08-03T18:58:10Z | - |
dc.date.issued | 2002-11 | - |
dc.identifier.issn | 1677-5090 | - |
dc.identifier.uri | http://repositorio.ufba.br/ri/handle/ri/18012 | - |
dc.description | p.80-85 | pt_BR |
dc.description.abstract | A utilização de sondas de DNA para análise genômica em fase sólida tem se expandido e ultrapassado as áreas da pesquisa, estendendo-se ao terreno do diagnóstico de rotina nas áreas de medicina humana e animal, bem como nas ciências forenses. Estas sondas têm sido utilizadas desde o surgimento da primeira técnica de hibridização descrita com o southern blotting, que envolve a imobilização, em filtros de papel, de fragmentos de DNA separados eletroforeticamente. Outra técnica descrita como o dot-hibridização é menos complexa do que o southern convencional por não requerer o passo prévio de eletroforese e por ser menos exigente quanto à qualidade do DNA, já que dispensa a digestão com enzima de restrição. A marcação mais comum para estas sondas é o fósforo radioisótopo (32P), que, apesar de sua alta sensibilidade, apresenta os inconvenientes de risco físico, necessidade de autorização para manipulação de radioisótopos, alto custo e uma vida média muito curta. Uma série de alternativas para o 32P têm sido utilizadas, com marcas diretas ou secundárias, entre elas a biotina, que tem mostrado grandes vantagens e tem sido usada também em laboratórios especializados e bem equipados. Este trabalho descreve uma modificação do método clássico descrito para sondas de DNA acopladas por biotina hidrazida. Utilizamos a N-hidroxisuccinimida biotina (BNHS) em dimetilformamida, para marcar resíduos de citosina disponíveis em segmentos de fita simples de DNA extraído de Corynebacterium pseudotuberculosis. A variação da proporção de biotina e de DNA, bem como sua especificidade e sensibilidade, foram cuidadosamente testadas e criteriosamente analisadas através de ensaios de hibridização, adsorvendo-se DNA cromossômico do C. pseudotuberculosis e outros DNAs em papel de nitrocelulose, seguindo-se a incubação com as sondas biotiniladas descritas, avidina-peroxidase e revelação com 4-cloro-1-naftol. Os resultados mostraram que a sonda de DNA produzida tem as características favoráveis esperadas. Desde que não é necessário o nick translation nem a utilização de material radioativo ou mesmo de hidrazida, sondas deste tipo podem ser utilizadas no auxílio do diagnóstico de infecções por C. pseudotuberculosis e outros microorganismos. | pt_BR |
dc.language.iso | pt_BR | pt_BR |
dc.publisher | Instituto de Ciências da Saúde/ Universidade Federal da Bahia | pt_BR |
dc.rights | Acesso Aberto | pt_BR |
dc.source | http://www.portalseer.ufba.br/index.php/cmbio/issue/archive | pt_BR |
dc.subject | Biotinilação | pt_BR |
dc.subject | Sonda de DNA | pt_BR |
dc.subject | Corynebacterium pseudotuberculosis | pt_BR |
dc.subject | Nhidroxisuccinimida biotina | pt_BR |
dc.subject | hibridização de DNA | pt_BR |
dc.title | Produção de sonda de DNA diretamente biotinilada com N-hidroxisuccinimida biotina (BNHS) | pt_BR |
dc.title.alternative | Revista de Ciências Médicas e Biológicas | pt_BR |
dc.type | Artigo de Periódico | pt_BR |
dc.description.localpub | Salvador | pt_BR |
dc.identifier.number | v.1, n.1 | pt_BR |
dc.publisher.country | Brasil | pt_BR |
Aparece nas coleções: | Artigo Publicado em Periódico (PPGPIOS) |
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Arquivo | Descrição | Tamanho | Formato | |
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