Produção de metaloproteinase 9 por monócitos de pacientes com leishmaniose cutânea

Abstract

A leishmaniose cutânea causada por Leishmania braziliensis é caracterizada pela presença de uma ou mais lesões ulceradas, de bordas elevadas. Células T CD4+ e CD8+ atuam como fonte produtora de citocinas que ativam macrófagos para destruição do parasita. Monócitos circulantes constituem uma população heterogênea, subdividida em: monócitos clássicos (CD14++CD16-), intermediários (CD14++CD16+) e não-clássicos (CD14+CD16++), e são conhecidos por migrarem para sítios inflamatórios e secretarem citocinas. TNF pode mediar a patologia da LC através de vários mecanismos entre eles, indução de óxido nítrico (NO), aumento de citotoxidade e expressão de metaloproteinases de matriz (MMPs). MMP-9 é uma enzima dependente de zinco, que degrada colágeno tipo IV, componente da membrana basal e, é controlada pelo TIMP-1 (tissue inhibitor of metalloproteinase-1). Recentemente, foi demonstrada que a infecção de macrófagos por L. braziliensis aumenta a expressão de MMP-9. Embora os fatores que induzem a ruptura da membrana basal levando ao desenvolvimento da úlcera ainda não sejam conhecidos, é provável que a MMP-9 contribua para os danos teciduais na LC. Objetivo: investigar a contribuição das sub-populações de monócitos para produção de MMP-9. Desenho do estudo: Estudo transversal, com 28 pacientes com LC, 12 com LCR e 20 controles sadios. Material e Métodos: Células mononucleares foram obtidas de todos os participantes da pesquisa para a marcação ex-vivo das sub-populações de monócitos e MMP-9, e a frequência destas células foi determinada por citometria de fluxo. Realizou-se cultura por 72 horas estimulando as células com SLA e os níveis de MMP-9 e TIMP-1 nos sobrenadantes foram determinados por ELISA. A contribuição de TNF para a produção de MMP-9 foi determinada na presença ou ausência de TNF recombinante em cultura de CMSP por 24 horas e os níveis de MMP-9 foram determinados por ELISA. Resultados: Monócitos foram as principais células produtoras de MMP-9 e as três sub-populações de monócitos de pacientes com LCR e LC expressaram mais MMP-9, quando comparados com as de indivíduos sadios. Em pacientes com LC a sub-população de monócitos não-clássicos foi a principal fonte produtora de MMP-9. Níveis elevados de MMP-9 e baixos níveis de TIMP-1 foram encontrados em sobrenadantes de cultura de CMSP de pacientes com leishmaniose cutânea. A presença de TNF em cultura de CMSP induziu a secreção de MMP-9. Conclusão: Altos níveis de TNF em pacientes com leishmaniose cutânea contribuem para a produção de MMP-9 por monócitos.