Expressão de microRNAs e distribuição de proteínas relacionados à ativação de macrófagos M2 em carcinoma escamocelular de boca

Abstract

Os macrófagos M2 são as principais células imunes com função pró-tumoral no microambiente de tumores sólidos. A abordagem de microRNAs (miRNAs) reguladores da função de macrófagos em carcinoma escamocelular de boca (CEB) requer investigação. O objetivo deste trabalho foi examinar em CEB o padrão de expressão de miRNAs relacionados com funções relacionadas aos macrófagos M2, em relação à distribuição tumoral destas células e à classificação histopatológica dos tumores. Após microdissecção, a expressão de miRNAs foi investigada por qRT-PCR em 35 amostras de CEB parafinizadas. Adicionalmente, a semi-quantificação de macrófagos totais (CD68+) e M2 (CD163+ e CD204+) no estroma periparenquimal e no compartimento intraparenquimal foi realizada em amostras correspondentes por imunohistoquímica. As amostras investigadas mostraram expressão desregulada dos miR-511-5p (84,85%), miR-511-3p (81,25%), miR-143-3p (60%) e let-7c-5p (60%). Particularmente, o miR-511-5p exibiu expressão aumentada em 72,73% dos casos. Além disso, os níveis dos miRNAs se apresentaram correlacionados positivamente entre si (p<0,05). Não foi demonstrada associação entre a expressão dos miRNAs e a classificação histopatológica dos tumores. Todos os casos apresentaram presença de macrófagos CD68+, CD163+ e CD204+, com infiltração maciça no estroma periparenquimal. As subpopulações de macrófagos foram positivamente correlacionadas entre si em ambas as microlocalizações (p<0,05), sem diferenças significantes entre a contagem de macrófagos CD68+, CD163+ e CD204+. O número de macrófagos CD68+ no estroma periparenquimal mostrou-se elevado em tumores moderadamente/pouco diferenciados (p=0,017). No entanto, não foi observada correlação entre o número de macrófagos e a expressão dos miRNAs. Nossos dados sugerem que a expressão aumentada do miRNA-511-5p apresenta envolvimento na tumorigênese do CEB. Além disso, semelhanças observadas na infiltração das subpopulações investigadas corroboram com a evidência atual de que no microambiente do CEB os macrófagos apresentam ativação predominantemente alternativa.

M2 macrophages are the main immune cells with protumoral function in solid tumor microenvironment. The approach of microRNAs (miRNAs) regulating macrophages function on oral squamous cell carcinoma (OSCC) requires investigation. The purpose of this study was to study in OSCC the expression pattern of miRNAs related to M2 macrophages functions in relation to tumoral distribution of these cells and histopathological grading of tumors. After microdissection, expression of miRNAs was investigated by qRT-PCR in 35 paraffin embedded OSCC samples. Additionally, semi-quantification of total (CD68+) and M2 (CD163+ and CD204+) macrophages in periparenchymal stroma and intraparenchymal compartment were performed in corresponding samples by immunohistochemistry. The investigated samples showed deregulated expression of miR-511-5p (84.85%), miR-511-3p (81.25%), miR-143-3p (60%) and let-7c-5p (60%). Particularly, miR-511-5p exhibited overexpression in 72.73% of the cases. In addition, miRNAs levels were positively correlated (p< 0.05). No association between miRNAs expression and histopathological grading of tumors was demonstrated. All cases exhibited presence CD68+, CD163+ and CD204+ macrophages, with massive infiltration in the periparenquimal stroma. The subpopulations of macrophages were positively correlated in both microlocalizations (p<0.05), with no differences between the CD68+, CD163+ and CD204+ macrophages counting. The number of CD68+ macrophages in the periparenquimal stroma was elevated in moderately/poorly differentiated tumors (p=0.017). However, no correlation was observed between number of macrophages and miRNAs expression. Our data suggest that overexpression of miRNA-511-5p presents involvement in OSCC tumorigenesis. Moreover, similarities observed in infiltration of investigated subpopulations corroborates to the current evidence that in OSCC microenvironment the macrophages predominantly express alternative activation.