DSpace Coleção:https://repositorio.ufba.br/handle/ri/14062024-03-29T08:19:54Z2024-03-29T08:19:54ZEstudo genético e clínico da Síndrome de Williams-Beuren em pacientes do nordeste brasileiroTopázio, Bianca Arcarohttps://repositorio.ufba.br/handle/ri/342242022-07-05T17:04:17Z2021-09-11T00:00:00ZTítulo: Estudo genético e clínico da Síndrome de Williams-Beuren em pacientes do nordeste brasileiro
Autor(es): Topázio, Bianca Arcaro
Abstract: Introdução: A Síndrome de Williams-Beuren (SWB) é uma doença de etiologia genética,
causada pela microdeleção da região 7q11.23. As principais características clínicas da
síndrome são dismorfologias faciais típicas, deficiência intelectual, cardiopatia congênita e
personalidade amigável. A Hibridação In Situ por Fluorescência (FISH) é uma importante
ferramenta no diagnóstico de pacientes com SWB, sendo considerada a técnica “padrão
ouro”, porém é limitada por sua resolução, não identificando deleções atípicas e
duplicações. A Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) surge, então,
como uma alternativa à FISH sendo uma técnica mais informativa que permite a
caracterização detalhada da região deletada. Objetivos: O presente estudo teve como
objetivo principal identificar e caracterizar alterações genômicas na região crítica da SWB
não diagnosticadas pela FISH. Casuística: Foram estudados 24 pacientes da rede pública
de saúde do Nordeste Brasileiro que apresentavam cariótipo normal e suspeita /
diagnóstico clínico da SWB. Metodologia: Foram realizadas as técnicas de FISH e MLPA
e caracterização clínica dos pacientes. Resultados: O presente trabalho confirmou o
diagnóstico clínico para SWB de 16/24 (66,7%) pacientes estudados. A MLPA confirmou
todas as 16 deleções identificadas pela FISH, além de caracterizá-las como deleções
típicas da região crítica da SWB. Nos demais 8 pacientes que apresentavam FISH normal,
a MLPA confirmou a ausência de alterações citogenômicas em 7q11.23 em 7 deles, e
identificou uma duplicação atípica da região crítica da SWB em um paciente, contrariando
o diagnóstico clínico. Além disso, foi identificado um caso SWB familial entre mãe e filha,
raramente encontrado na SWB. Conclusões: A avaliação genética nesse estudo permitiu
confirmar a SWB na maioria dos pacientes estudados. Ambas as metodologias da FISH e
MLPA são eficientes na confirmação diagnóstica da SWB. No entanto, somente a MLPA é
capaz de caracterizar e identificar possíveis duplicações. O diagnóstico genético de
pacientes com suspeita clínica de SWB é de grande importância para o prognóstico dos
pacientes, esclarecimentos aos familiares e realização de aconselhamento genético
preciso para estas famílias.; Introduction: Williams-Beuren syndrome (WBS) is a genetic etiology disease caused by
microdeletion of 7q11.23 region. The main clinical features of the syndrome are typical facial
dysmorphology, intellectual disability, congenital heart disease and friendly personality. The
Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) is an important tool in the diagnosis of patients
with WBS, considered the technique "gold standard", but is limited by its resolution, not
identifying atypical deletions and duplications. The Multiplex Ligation-dependent Probe
Amplification (MLPA) arises, then, as an alternative to FISH, a more informative technique
that allows detailed characterization of the deleted region. Objectives: This study aimed to
identify and characterize genomic alterations in the critical region of WBS not diagnosed by
FISH. Patients: We studied 24 patients in the public health of the Brazilian Northeast with
normal karyotype and suspected / clinical diagnosis of WBS. Methodology: We performed
the techniques of FISH and MLPA and clinical characterization of patients. Results: This
study confirmed the clinical diagnosis for WBS in 16/24 (66.7%) patients. The MLPA has
confirmed all 16 deletions identified by FISH, and characterize them as typical deletions of
critical region of WBS. In the remaining 8 patients with normal FISH, the MLPA confirmed
the absence of changes in 7q11.23 in 7 of them, and identified an atypical duplication of the
critical region of the WBS in one patient, contrary to the clinical diagnosis. In addition, it
identified a case of WBS familial between mother and daughter, rarely found in WBS.
Conclusions: The genetic evaluation in this study confirmed the WBS in most patients.
Both methods of FISH and MLPA are effective in diagnostic confirmation of WBS. However,
only the MLPA is able to characterize and identify possible duplications. Genetic diagnosis
of patients with clinical suspicion of WBS is of great importance for the prognosis of patients,
explanations to family and making an accurate genetic counseling for these families.
Tipo: Dissertação2021-09-11T00:00:00ZFitoligantes derivados de plantas medicinais e ativação do receptor do hormônio tireoidianoReis, Luã Tainã Costahttps://repositorio.ufba.br/handle/ri/286922022-07-05T17:04:26Z2019-02-21T00:00:00ZTítulo: Fitoligantes derivados de plantas medicinais e ativação do receptor do hormônio tireoidiano
Autor(es): Reis, Luã Tainã Costa
Abstract: Os receptores nucleares (RN) fazem parte de uma superfamília de fatores de transcrição
que são ativos mediante interação com ligantes e controlam amplamente a fisiologia
humana através do controle da expressão gênica. Diversas moléculas podem se ligar e
alterar a atividade destes receptores, desde cofatores até hormônios, tais como o estrógeno
e o hormônio tireoidiano. Devido a essas características, os RN são alvos de pesquisa,
principalmente no campo de drug design onde moléculas sintéticas são produzidas para
causar uma resposta em genes alvo. Além dos hormônios endógenos e das drogas
sintéticas, moléculas encontradas em plantas também podem modular estes receptores. O
Brasil possui grande biodiversidade e, associado a isto, amplo conhecimento sobre o uso
de plantas medicinais. Neste trabalho foram testadas plantas indicadas previamente por
levantamento etnobotânico como possíveis ligantes vegetais moduladores do receptor de
hormônio tireoidiano. Para tal foram feitos ensaios in vitro com o receptor full length
clonado em E. coli e usado em ensaios de gene-reporter para medir possível ativação
gênica sobre os genes controlados pelo TRβ. Quatro plantas demonstraram capacidade
moduladora sobre este receptor: o Cajanus cajan, a Abarema cochliocorpos e a Borreria
verticillata e Stillingia saxatilis. A descoberta de compostos naturais com capacidade de
ativar e inibir genes abre um campo novo na farmacologia e biotecnologia de importância
imensurável devido ao grande número de receptores nucleares existentes (mais de 100),
que controlam a fisiologia humana, e por isso estão envolvidos com inúmeras patologias.; Nuclear receptors (NR) are part of a superfamily of transcription factors that are active
through interaction with ligands and widely control human physiology through gene
expression. Many molecules can bind and change the activity of these receptors, from
cofactors to hormones, such as estrogen and triiodothyronine. According to that, NR are
targets of research, mainly in the field of drug design, where synthetic molecules are
produced to cause a response in target genes. In addition to the endogenous hormones and
synthetic drugs, molecules found in plants can also modulate these receptors. Brazil has a
great biodiversity and, in addition to that, extensive knowledge about the use of medicinal
plants. In this work plants indicated beforehand by ethnobotanical survey as possible plant
ligands of thyroid hormone receptor were tested as modulators. With this purpose, in vitro
assays were done with full length receptor cloned in E. coli and used in gene-reporter
assays to measure possible activation of genes controlled by TRβ. Three plants
demonstrated capacity on modulating this receptor: Cajanus cajan, Abarema cochliocorpos
and Borreria verticillata. The discovery of natural compounds with ability to activate and
inhibit genes opens a new field in pharmacology and biotechnology of immeasurable
importance due to the large number of existing nuclear receptors (more than 100), which
control human physiology, and are involved in numerous pathologies.
Tipo: Dissertação2019-02-21T00:00:00ZAnatomia foliar e diversidade genética em Passiflora spp. (Passifloraceae L.) resistentes ao Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV)Barbosa, Naira Costa Soareshttps://repositorio.ufba.br/handle/ri/188282022-07-05T17:04:50Z2016-04-06T00:00:00ZTítulo: Anatomia foliar e diversidade genética em Passiflora spp. (Passifloraceae L.) resistentes ao Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV)
Autor(es): Barbosa, Naira Costa Soares
Abstract: O maracujá, Passiflora sp., possui grande importância econômica no Brasil, sendo
o país o principal produtor mundial da fruta e importante centro de diversidade do
gênero. As pragas são os principais problemas que afetam a cultura, e dentre
estas destaca-se o endurecimento do fruto, causada, principalmente, pelo
Cowpea aphid-borne mosaic virus, CABMV. Ainda não se conhece uma medida
de controle efetiva para esta doença, de forma que são imprescindíveis técnicas
alternativas para seu controle e manejo. Neste contexto, o melhoramento genético
do maracujazeiro pode ser realizado a partir de espécies silvestres resistentes a
pragas. Este trabalho teve como objetivos: a) avaliar as alterações anatômicas
decorrentes da infecção com o CABMV em cinco espécies de Passiflora (P. edulis
f. flavicarpa, P cincinnata, P. gibertii, P. maliformis e P. setacea) e b) avaliar a
diversidade genética em populações da espécie com menores alterações
anatômicas decorrentes da infecção. Para a avaliação anatômica foi estabelecido
um ensaio biológico, constituído de seis plantas de cada espécie, das quais a
metade foi inoculada mecanicamente com um isolado do CABMV e a outra
metade inoculada somente com tampão de inoculação. Após 60 dias da
inoculação, foram coletadas, como amostras, a quinta folha, do ápice para a base,
de cada planta. As amostras foram fixadas em FAA e posteriormente conservadas
em etanol 70%, posteriormente foram realizadas seções paradérmicas e
transversais, à mão livre e em micrótomo rotativo. Para cada espécie foram
realizadas comparações das plantas infectadas com as sadias através de
análises qualitativas e quantitativas. As alterações anatômicas observadas nas
plantas infectadas foram a hiperplasia e hipertrofia de células parenquimáticas,
depressões no limbo e desorganização do sistema vascular. P. setacea foi a
espécie que, quando infectada com o vírus, apresentou menos alterações
anatômicas, sendo selecionada para o estudo de diversidade genética. Para
tanto, foram coletadas folhas jovens de 18 populações no estado da Bahia, nas
regiões do Centro-Sul e Chapada Diamantina, totalizando 147 indivíduos, e
testados 55 loci de SSR, dos quais seis foram selecionados para as análises. Os
resultados das análises bayesiana de estruturação genética e da análise fenética
indicaram a existência de dois grupos genéticos no estado, que não apresentaram
correlação significativa com as distâncias geográficas. A AMOVA mostrou grande
diversidade interpopulacional (45%), apesar do maior percentual de variação
intrapopulacional (55%). Foi encontrado um Gst médio de 0,221 indicando um alto
nível de estruturação genética entre as populações. As populações de maior
diversidade foram as de Licínio de Almeida e Caetité, com maior percentual de
polimorfismo, além de pertencerem a grupos genéticos distintos, sendo, portanto,
consideradas as mais promissoras para enriquecimento de bancos de
germoplasma de P. setacea e utilização em programas de melhoramento genético
do maracujá.; The passion fruit, Passiflora sp., has great economic importance in Brazil, the
country the world's leading producer of fruit and important gender diversity center.
Pests are the main problems affecting the culture, and among them stands out the
passion fruit woodiness disease, caused mainly by the Cowpea aphid-borne mosaic
virus, CABMV. An effective control measure for this disease has not yet known, so
that they are indispensable alternative techniques for its control and management. In
this context, the genetic improvement of passion fruit can be held from wild species
that are resistant to diseases and pests. This work aimed: a) to evaluate the
anatomical changes resulting from infection with CABMV in five species of Passiflora
(P. edulis f. flavicarpa, P cincinnata, P. gibertii, P. maliformis and P. setacea) and b)
to evaluate the genetic diversity in populations of species with smaller anatomical
changes resulting from infection. For anatomical assessment was established a
bioassay, consisting of six plants of each species, of which half were mechanically
inoculated with an isolated characterized the CABMV and the other half only
inoculated with inoculation buffer. After 60 days of inoculation, they were collected as
samples, the fifth leaf from the apex to the base of each plant. Samples were fixed in
FAA and later preserved in 70% ethanol, were subsequently held paradermic and
cross sections, freehand and rotary microtome. For each species comparisons were
made of plants infected with sound through qualitative and quantitative analysis. The
anatomical changes observed in infected plants were hyperplasia and hypertrophy of
parenchyma cells, depressions in limbo and disorganization of the vascular system.
P. setacea was the kind that when infected with the virus, had fewer anatomical
changes, being selected for the study of genetic diversity. To this end, young leaves
of 18 populations were collected in the state of Bahia, in the regions of South-Central
and Chapada Diamantina, totaling 147 individuals, and 55 tested loci SSR, of which
six were selected for analysis. The results of bayesian analysis of genetic structure
and phenetics analysis indicated the existence of two genetic groups in the state,
which showed no significant correlation with the geographical distances. The
AMOVA showed great inter-population diversity (45%), despite the higher
percentage of intra-population variation (55%). An average Gst was found of 0.221
indicating a high level of genetic structure among populations. The populations of
most diversity were Licinio de Almeida and Caetité, with the highest percentage of
polymorphism, in addition to belonging to different genetic groups and they are
therefore considered the most promising for enrichment of P. setacea genebanks
and use in breeding programs of passion fruit.
Tipo: Dissertação2016-04-06T00:00:00Z