Microbiota estreptocócica associada com a formação inicial da placa dental

Abstract

A identificação e quantificação dos estreptococos que iniciam a colonização das superfícies dos dentes no biofilme complexo da placa dental, bem como a compreensão das relações funcionais entre eles e outros membros são fundamentais para avaliar e, possivelmente, controlar os processos que essa comunidade inicial desempenha. Placas bacterianas foram assepticamente removidas de dentes de pessoas sadias e experimentalmente inoculadas em unidades dentárias esterilizadas e previamente cobertas com fluido oral estéril. Cada unidade dentária (UD) inoculada foi incubada a 37°C em uma câmara úmida. Após a formação da placa, a UD foi colocada em uma solução desagregadora da placa (SD) constituída de 0,1% de água peptonada, 0,1% de Tween 80 e 0,5% de areia calcinada (p/v). A UD foi submetida sucessiva e progressivamente à agitação em cinco velocidades controladas. Imediatamente após cada agitação, alíquotas foram coletadas e diluídas em tampão fosfato estéril, pH 7,2. Após cada coleta das alíquotas e antes de nova agitação, a UD era lavada em solução PBS estéril e novamente imersa em nova SD. Experimentos in vivo foram também efetuados, em unidades dentárias recentemente extraídas, usando a mesma técnica. Alíquotas das diluições foram semeadas na superfície de meios apropriados por disseminação usando uma alça de Drigalsky. As placas foram incubadas a 37°C em anaerobiose por 48 horas, quando, então, efetuavam-se as contagens total e diferencial das colônias. Cada tipo colonial era subcultivado e submetido a testes padrões para identificação bacteriana. De um total de 86 culturas de Streptococcus estudadas, 40,7% foram identificadas como S. sanguis, 37,2% como S. oralis, 8,1% como S. mutans, 7,0% como S. gordonii e 7,0% como outros estreptococos. Análises das culturas isoladas da última velocidade de agitação mostraram que, nos experimentos in vitro, somente S. oralis (66,7%) e S. sanguis (33,3%) estavam presentes. No experimento in vivo, os S. sanguis (56,5%) predominaram, seguidos do S. oralis (21,7%), S. mutans (15,2%) e outros estreptococos (6,5%). Os experimentos efetuados para verificar a capacidade de adesão de sete culturas dos estreptococos isolados mostraram que somente uma cepa de S. oralis e uma cepa de S. sanguis aderiram às superfícies dos dentes.